Amidase (AMD)
enzymen:Zijn macromoleculaire biologische katalysatoren, de meeste enzymen zijn eiwitten?
Amidase:Katalyseer de hydrolyse van verschillende endogene en vreemde alifatische en aromatische amiden door een acylgroep over te brengen naar water met de productie van vrije zuren en ammoniak.Hydroxaminezuren en andere organische zuren worden veel gebruikt als geneesmiddelen omdat ze bestanddelen zijn van groeifactoren, antibiotica en tumorremmers.De amidasen kunnen worden onderverdeeld in acylasen van het R-type en S-type volgens de stereoselectiviteit van de katalysator.
Naast het katalyseren van de hydrolyse van amiden, kan amidase ook acyloverdrachtsreacties katalyseren in aanwezigheid van co-substraten zoals hydroxylamine.
Amidase met verschillende bronnen hebben verschillende substraatspecificiteit, sommige kunnen alleen aromatische amiden hydrolyseren, sommige kunnen alleen alifatische amiden hydrolyseren en sommige hydrolyseren α- of ω-aminoamiden.De meeste aminen hebben alleen een goede katalytische activiteit voor acyclische of eenvoudige aromatische amiden, maar voor complexe aromaten zijn heterocyclische amiden, vooral amiden met ortho-substituenten, over het algemeen laag in activiteit (slechts enkele enzymen vertonen betere katalytische effecten).
Katalytisch mechanisme:
| Enzymen | Productcode | Productcode |
| Enzym Poeder | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | een set van 19 amidasen, elk 50 mg 19 stuks * 50 mg/stuk, of een andere hoeveelheid |
| Screeningskit (SynKit) | ES-AMD-1900 | een set van 19 amidasen, elk 1 mg 19 stuks * 1 mg / stuk |
★ Hoge substraatspecificiteit.
★ Sterke chirale selectiviteit.
★ Hoge conversie-efficiëntie.
★ Minder bijproducten.
★ Milde reactieomstandigheden.
★ Milieuvriendelijk.
➢ Enzymscreening moet worden uitgevoerd voor specifieke substraten vanwege de substraatspecificiteit, en een enzym krijgen dat het doelsubstraat katalyseert met het beste katalytische effect.
➢ Nooit contact met extreme omstandigheden zoals: hoge temperatuur, hoge/lage pH en organisch oplosmiddel met hoge concentratie.
➢ Normaal gesproken moet het reactiesysteem substraat en bufferoplossing bevatten (de optimale reactie-pH van het enzym).Co-substraten zoals hydroxylamine dienen aanwezig te zijn in het acyloverdrachtsreactiesysteem.
➢ AMD moet als laatste aan het reactiesysteem worden toegevoegd met een optimale reactie-pH en -temperatuur.
➢ Alle soorten LMD hebben verschillende optimale reactieomstandigheden, dus elk van hen moet afzonderlijk worden bestudeerd.
voorbeeld 1(1):
Hydrolyse-activiteit naar verschillende amidesubstraten
| Substraat | Specifieke activiteit mol min-1mg-1 | Substraat | Specifieke activiteit mol min-1mg-1 |
| Acetamide | 3.8 | ο-OH-benzamide | 1.4 |
| Propionamide | 3.9 | p-OH-benzamide | 1.2 |
| Lactamide | 12.8 | ο-NH2benzamide | 1.0 |
| Butyramide | 11.9 | p-NH2benzamide | 0,8 |
| Isobutyramide | 26,2 | ο-Toluamide | 0.3 |
| pentaanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
| hexaanamide | 6.4 | Nicotinamide | 1,7 |
| Cyclohexanamide | 19.5 | isonicotinamide | 1.8 |
| Acrylamide | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
| Metacrylamide | 3.5 | 3-Fenylpropionamide | 7.6 |
| Prolinamide | 3.4 | Indol-3-aceetamide | 1.9 |
| benzamide | 6.8 |
De reactie werd uitgevoerd in 50 mM natriumfosfaatbufferoplossing, pH 7,5, bij 70 .
| amiden | Hydroxylamine | hydrazine |
| Acetamide | 8.4 | 1.4 |
| Propionamide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutyramide | 25.0 | 22,7 |
| benzamide | 9.2 | 6.1 |
De reactie werd uitgevoerd in 50 mM natriumfosfaatbufferoplossing, pH 7,5, bij 70 .
Gerelateerde reagensconcentratie: amiden, 100 mM (benzamide, 10 mM);hydroxylamine en hydrazine, 400 mM;enzym 0,9 uM.
Voorbeeld 2(2):
Voorbeeld 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremofielen, 2001, 5: 183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Procesbiochemie, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Bio-organische chemie, 2017, online beschikbaar 7.
